如何检测抗精子抗体?精子抗原检查的过程是怎么样的呢?
精液是孕育过程不可以缺少的一个重要部分,我们都知道,正常的精液在射出时呈液化状态,但立即凝固成胶冻状或凝块状,约经10~20分钟就液化成水样液体,此一过程称为精液的液化,属正常的生理现象。如果都按照正常发展,男性精子不液化就会出现良好的怀孕过程,可是总会有一些异常阻断这一良好过程。那么怎么才能知道这样的结果呢?就是做精子抗原检查,那么如何检测抗精子抗体?精子抗原检查的过程是怎么样的呢?
如何检测抗精子抗体?精子抗原检查的过程是怎么样的呢?
(1)取丈夫新鲜精液,液化后离心去上清。
(2)沉淀用 pbs离心洗 3次,较终配成 5×104/ml 精子悬液。
(3)精子悬液涂片,一式两份,室温自然干燥。
(4)甲醇固定 10min。
(5)分别加夫妇血清、已知阳性血清和阴性对照血清(处女 ab 型血清),37℃ 湿盒30min。
(6)pbs洗 3次,晾干。
(7)加 1∶1000稀释的 hrp-羊抗人 igg(fab?)237℃ 湿盒 30min。
(8)pbs洗 3次。
(9)加底物溶液,37℃ 湿盒反应 15min。
(10)pbs洗 3次,吹干镜检。
【结果判断】
油镜下观察,精子呈棕黄色为阳性,精子不着色或极淡黄色为阴性。
(三)酶联免疫吸附试验(enzyme-linked immunosorbentassay,elisa)
如何检测抗精子抗体?精子抗原检查的过程是怎么样的呢?其原理都有哪些呢?本法用带正电荷的聚氯乙烯(pvc)微量反应板,将精子抗原吸附到聚氯乙烯固相载体表面,其固相抗原可与待测标本中抗精子抗体(as-ab)结合,并与加入的抗人 igg 酶结合物起反应,形成抗原抗体酶结合物,较终在酶底物作用下而显色。