试管玻片凝集试验
试管玻片凝集试验(又称为 F-D 法)
【准备】
(1)配制 Baker液(同上)或生理盐水。
(2)从患者血液中分离血清,经 56℃ 30min灭活补体处理,并以 Baker液或生理盐水把原血清作 1∶5稀释。
(3)精子悬浮液:取新鲜正常精液(同上)以 Baker液或生理盐水调整精子数为 4 ×106/mL。
【方法】
(1)取 0.25mL 处理后待检血清移置一小试管,加入 0.25mL 精子悬浮液。在另一小试管内加0.25mL Baker液或生理盐水,再加入 0.25mL 精子悬浮液作阴性对照。
(2)在 37℃ 条件下孵育 30min、60min、120min、240min,从小试管内分别取出一滴混合液放在载玻片上,加上盖玻片。
(3)在高倍镜下(400× ),观察精子凝集情况。
【判断】
阴性:未见精子凝集。
阳性:在 10个高倍视野下,有 5个以上视野出现 2个以上精子凝集者,判为阳性。
注:1991年张秀成对本法的操作略有变动:① 精子悬液,取新鲜精液后,用 Baker液洗3次,调精子浓度为 5×106/mL 供试验用;② 血清及精子悬液用量均为 0.1mL;③ 37℃ 孵育 1h;④ 有 3条精子以上凝集为阳性。