精子凝结试验的评价
凝集试验的评价
广泛应用的精子凝集试验基本原理相同,方法有所不同,各有特点。其中以浅盘凝集试验敏感性较高,样品及精液用量少,既可定性、又可定量,还可以定型,适用于大量样品检查。
精子凝集素属γ-球蛋白,可被洗净精子或精浆吸收,说明它是抗精子精浆抗体之一,但精子有非特异性自凝现象,类固醇激素引起的β-球蛋白以及样品中的支原体、衣原体、病毒等微生物都可能使精子出现凝集。因此,排除非特异性凝集现象是整个凝集试验的关键:
① 每次试验应设立已知阴性和阳性血清作对照,凡对照不能确立,要重复试验。阴性对照成立表明实验结果,阳性对照相符表明试验结果的敏感性和性。
② 试验用精液需新鲜正常,待检血清不得污染,对照血清要作 100μL 分装置在 70℃ 保存,用时溶解。稀释液要新鲜配制。
③ 待检血清开始用 1∶16、1∶32、1∶64三个稀释度筛选,3个稀释度均无凝集者判为阴性,2 个稀释度出现凝集判为阳性,1∶64 有凝集时,血清需往上稀释(1∶64、1∶256、1∶1024、1∶4096)重新测定,直至测出阳性终点为止。
低效价的凝集素不一定是抗精子抗体,但价的精子凝集素肯定是抗精子抗体,而且与不孕症有关,因此临床上把血清效价在 1∶8以上者作为有诊断意义的界限。
精子凝集类型大致有 4 种,即头对头、尾对尾、中段对中段和混合型等。有人认为头对头一般为 IgM,IgG;尾对尾、中段对中段则为 IgG。不过人们已注意到当抗体效价非常高时,在低稀释度显示的凝集类型与高稀释度的凝集类型不一样,如低度是混合型,而高度是头对头型。因此,通常的凝集活性以少于 30% ~ 50% 精子凝集时的稀释度作为滴度记录。